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如何正確使用ELISA板進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?
更新時(shí)間:2025-10-24瀏覽:109次

  如何正確使用ELISA板進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?

  以下是ELISA板正確使用的實(shí)驗(yàn)指南,本生結(jié)合關(guān)鍵操作要點(diǎn)和常見(jiàn)問(wèn)題解決方案:

  一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

  板選擇與處理?

  優(yōu)先選用聚苯乙烯材質(zhì)96孔板(吸附性能均衡),新板需用去離子水沖洗去除雜質(zhì)?

  包前用碳酸鹽緩沖液(pH 9.6)平衡,避免溫差導(dǎo)致板變形

  試劑配制?

  標(biāo)準(zhǔn)品需現(xiàn)配現(xiàn)用,凍存樣本避免反復(fù)凍融(建議分裝保存)

  封閉液推薦5% BSA-PBST(含0.05%吐溫20),37℃預(yù)溫30分鐘

  二、核心操作步驟

  包被與封閉?

  抗原/抗體包被濃度1-10 μg/mL,100μL/孔,4℃過(guò)夜或37℃ 2小時(shí)?

  封閉液需覆蓋孔底,37℃孵育1小時(shí),拍干時(shí)避免殘留液體

  加樣與孵育?

  樣本與標(biāo)準(zhǔn)品同步加樣,避免邊緣效應(yīng)(邊緣孔可加PBS緩沖)

  37℃孵育時(shí)用保鮮膜封板,每10分鐘輕震混勻一次

  三、關(guān)鍵質(zhì)控點(diǎn)

  洗滌規(guī)范?

  手工洗板需拍干后立即加洗滌液,機(jī)器洗板需檢查針頭通暢性

  洗滌次數(shù)3-5次,最后一次拍干后30秒內(nèi)加下一試劑

  顯色控制?

  TMB避光孵育時(shí)間需預(yù)實(shí)驗(yàn)確定(通常10-20分鐘)

  終止液加入后15分鐘內(nèi)讀數(shù),雙波長(zhǎng)檢測(cè)(450/630nm)

  四、常見(jiàn)問(wèn)題處理

  高背景?:增加洗滌次數(shù)至5次,或更換封閉液為5%脫脂奶粉?

  板間差異?:同一實(shí)驗(yàn)使用同一批次板,加樣時(shí)使用多通道移液器

  注:具體參數(shù)需根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)調(diào)整,建議每板設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)曲線(R2>0.99)。

  注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。

  天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo),本生,您信任的合作伙伴!

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