国产白嫩受无套呻吟 I 亚洲综合色成在线播放 I 人妻在卧室被老板疯狂进入 I 免费精品国产 I 少妇高潮av久久久久久 I 一本一道色欲综合网 I 国产免费a视频 I 午夜免费国产体验区免费的 I 黄色大片网址 I 欧美一区2区三区3区公司 I 蜜桃av网 I 污视频免费在线看 I 亚洲成人av在线看 I 亚洲最大色综合成人av I 日本熟妇色一本在线看 I 欧美绿帽交换xxx I 伊人影院中文字幕 I 亚洲日韩国产中文其他 I 亚洲专区欧美 I 男女69式互添在线观看 I 久色成人网 I 人人婷婷人人澡人人爽 I 丰满少妇作爱视频免费观看 I 五月综合激情婷婷 I 久久天堂av综合色无码专区 I 高清视频毛片 I 久久永久免费人妻精品 I 成年无码av片在线狼人 I 色呦呦中文字幕 I 免费看操片

服務熱線:
15502280048
技術支持

您現在的位置:首頁  >  技術文章  >  細胞培養板的選擇與常見問題解答!

細胞培養板的選擇與常見問題解答!
更新時間:2019-10-31瀏覽:3414次

  細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。

  (1)平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇:

  貼壁細胞一般用平底培養板。懸浮型細胞的培養一般用V型。

  U型培養板亦多用于培養懸浮型細胞 。V型培養板有時用做免疫學血凝集的實驗。

  不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細胞都可用﹐但當細胞數目較少﹐如做克隆時﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實驗時﹐無論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面﹐當做兩種不同淋巴細胞混合培養時﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內。V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實驗時﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗也可用U型板替代(加入細胞后﹐低速離心)如果是養細胞的話,通常是選用平底的, 另外要特別注意材質, 標示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養細胞用的。

  圓底的好像沒聽說過拿來養細胞。 圓底的通常是拿來做分析, 化學反應, 或是保存樣品用的, 因為圓底比較好將液體吸得干凈,如果用平底的就不好吸了。

  (2)細胞培養常見問題與解答

  問:我看到培養板有4、6、12、24、48、96孔幾種規格 ,但不知道到底什么實驗用哪種規格。

  答:要根據你具體的實驗要求,流式一般用6孔,MTT一般用96孔,細胞爬片一般用24孔等,要具體根據你實驗來定。

  問:請問哪位高手知道Terasaki板是什么培養板,與普通細胞培養板有什么區別?

  答:Terasaki plate主要是用于晶體學研究,產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應用產品的外形結構也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結構。

  細胞培養板主要是PS材料。材料是treated sufface。便于細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料,同時還有low binding surface,有關更多實驗材料上的應用與對材料的選擇。

  問:我想測吸光度用酶標儀,用多孔細胞培養板行嗎?請問酶標板 多孔細胞培養板有什么區別?

  答:用多空細胞培養板測吸光度肯定可以拉,我們經常用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測。

  區別:酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養,它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量:不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

  (3)細胞培養板的密閉和污染問題

  細胞培養板的加樣和操作:細胞培養板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則,各項操作要保證規范、科學,不對細胞的生長造成額外的影響。這其中常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態的影響。

  問:96,24孔培養板或培養皿的蓋子都很松,這樣是方便了透氣,但是細菌、霉菌等污染物會不會也隨著溜進去呢?

  答:1.蓋子很松,屬于半開放培養,這樣的目的是透氣(實際上是為了使培養皿外的co2能夠與培養皿充分交換,維持培養基的pH值)。

  2.凡事有利必有弊,這樣當然增加了污染的可能性。此外這樣還會使培養皿內的液體蒸發,這對于定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養箱內空氣必須清潔(定期紫外線照,酒精擦洗,盡量少開關培養箱)b培養箱內的濕度必須始終保持為100%(培養箱內放置無菌蒸餾水的水槽)。

  就好像培養皿,也是一個蓋倒扣的容器,也不會污染。主要是因為蓋子“L”型邊緣產生氣流負壓的緣故,灰塵上面才附著有微生物,而氣流攜帶的灰塵是無法通過產生負壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴散,不會產生氣流,所以只會透氣不會透菌。

  我使用24孔板,在其中的某些孔中有操作(在超凈臺內),而其它孔中還有細胞要培養.我很擔心這樣會污染,不知道要注意什么?大家不知道有什么好的建議。

  使用前綜合考慮一下,充分使用所以的孔;如果只需要使用少數的孔可以只用一邊的,其余用蓋子蓋住,我習慣于先用右側的孔(右手加樣方便)。

  其實自己感覺只要注意無菌操作,一般是不會污染的。操作時用幾塊玻片把板子一側墊高,不要把蓋子全打開,一般沒問題。

  (4)細胞分布不均及解決辦法

  問:我的細胞接種培養板,細胞總是聚集在周邊部分,該如何處理啊?我看園子里有的戰友的細胞卻是聚集在中間,是不是板子的質量問題啊?

  答:請問你的細胞是如何混勻的?是滴管吹打還是振蕩培養板?如果是后者,而且是轉圈搖勻的話,很有可能由于離心力的作用使細胞甩到周邊部分,導致細胞中間少,四周多!自己可是試試!

  周邊一般是相對會多一點,但是中間的數量也不會很少啊~~ 鋪板的時候我也沒有特異去振蕩培養板。

  大概是板子的質量問題吧或者是不是鋪板時候的細胞密度太低了?我用的corning的板 。

  一個好辦法:在你培養種板之前,把培養板放入培養箱里進行幾個小時的飽和后再取出,種入細胞時力量要輕,可采取用滴頭在培養板孔的側面慢慢加入讓細胞懸液流入板孔中,培養的細胞基本是均勻生長。記住千萬不要用振蕩器振蕩,否則你的細胞就會想你說得那樣聚積在一起。

  我今天把培養板放入培養箱里幾個小時,適當的把細胞密度加大了一下,另外多加了一點培養液,今晚看細胞鋪的挺好的。我認為有兩種可能解決你問題的辦法:1.加入前吹打均勻;2.從多孔板側邊或底邊緩慢加入。

  問:我在做原代培養時也遇到過這種情況,我一直以為培養皿鋪膠不均勻會導致這種現象,因為混勻的血管段加入到培養皿中時,在相差顯微鏡下血管段均勻分布在培養皿中,24h后貼壁的血管段就是周邊多,中間相對少些。下次我要試試hkqu戰友的方法看能否改變這種現象。

  答:這種現象很正常呀,不知你仔細觀察過沒有,孔直徑愈小,這個現象越明顯,我試過,24、96孔板這種現象不可避免,因為液體的附壁使得孔內培養液不是成一個液平面,而是周邊高,就像凹鏡一樣,而使用這兩種孔板由于需要加干預等原因而不能加足量培養液,使得細胞隨培養液一起出現“邊集”現象,如果為了使孔中央也有均勻細胞而增加接種細胞數量的話,這要看你需要觀察何種指標,如果是MTT ,免疫組化的話會因為細胞成層而影響結果。

  (5)6孔板接種和換液問題:

  問:我的細胞傳代很正常,但一種到六孔板里(不管加藥和對照),總有兩三個孔(隨機)細胞長得不好,很小,像破碎了。有人遇到過這種情況嗎?到底是啥原因呢?請各位指點

  答:可能跟你加液的溫度有關。如果你細胞剛剛拿出來換液加液,培養基也是從4度冰箱拿出來不久,很容易細胞就會凍死了。建議你把培養基先在培養箱里邊孵育15min先。

  另外,跟你細胞的生長狀態也有關。加藥之前的細胞可以用高點的血清濃度培養。保證細胞狀態良好。

  或者放在37度水浴鍋里孵育也可以,或者是培養板本身的問題,你再換換其它培養板試試看。再有可能就是細胞狀態問題了,種板時的血清濃度調高試一下

  問:近幾天,我用六孔培養板接種細胞,培養24小時后更換培養基,在更換培養基之前,顯微鏡觀察到細胞貼壁,狀態非常的好,更換了培養基后,立即用顯微鏡觀察,發現每個孔中都近乎有一半的細胞表現出近乎死亡的狀態。細胞變得非常小,產生大量的碎片,而另一半的細胞一切正常,異常細胞與正常細胞之間存在一條分水嶺,上半個圓是好的,下半個圓就不好,這是怎么一回事?

  答:你可以看一下是不是培養板沒放水平。有一回我也出現過這種情況。

  你的培養液如何,如果培養液過期,細胞就不會貼壁。換一點新配制的培養液試一試。

  我也經常碰到,我想可能是板的問題,換一個牌子的板或換用培養瓶就沒問題了。

  不知樓主所需換液的培養板多不多,換培養基的時候如果沒有注意風機的影響,特別是所需換液的培養板很多時,容易使細胞因風吹失水而干縮破裂。如果如此,換液時應該逐個培養板進行,別怕浪費吸管,注意操作的效率!

  (6)24孔板接種問題:

  問:把細胞消化接種到24孔板之后,已經四天了,老是每孔的中間部分長不滿,每天換液時都用PBS 清洗,第二天換液時都出現同樣的情況,每孔的邊緣長的很好,中央大量死細胞?

  答:我是選擇孔內鋪蓋玻片,在玻片上種植。每次換液都用PBS洗,必要的步驟嗎?另外,也有可能和細胞種類有關或者和培養液有關?

  應該是培養液可能加的太少了。由于表面張力的作用,培養板的邊緣液體會向上走,造成培養液面呈現一個凹面(就像量筒的液體凹面一樣),中央的細胞正好在凹面的低處,培養液少,細胞的營養不夠,甚至干涸掉,空氣中的氧氣也會造成損傷,即使有增值過來的細胞也會死掉。

  個人經驗認為這是物理問題:24孔板小,細胞接種進去后是很難搖均勻的,結果導致細胞重貼壁后呈現四周密中間稀的狀況.至于中間較多死細胞,如果是懸浮狀的話,也一樣是物理問題。接種后比較粗暴的碰撞,似乎對搖均勻細胞有一定效果.

  同時你所說的細胞周圍密而中間稀疏,大約有如下原因:

  1.培養液加得太少。主要是由于液體張力的問題。

  2.細胞接種后震蕩太厲害了。由于離心力作用導致細胞分布到周圍。

  細胞分布均勻與否有一點很關鍵,即每種細胞是有個體差異的,別人的細胞操作不一定適合于你.所以要靠自己摸索,且找出專屬于自己細胞的一套規律,有如下經驗:

  1.所有待接種的細胞懸液在種板前一定要用吸管混勻。

  2.按資料記載,24孔板的液體量為1ml,個人也覺得1ml的量足矣。

  3.接種時,要慢慢加樣,且記得輕微旋轉槍頭,這樣做對細胞均勻分布有一定效果。

  4.接種后直接放入培養箱讓細胞適應培養板這個新的環境,個人認為沒有必要在室溫放置一段時間。

 

       注:僅供參考!

本生(天津)健康科技有限公司 版權所有    備案號:津ICP備19006588號-1

技術支持:化工儀器網    管理登陸    網站地圖

聯系電話:
18502669006

微信服務號

主站蜘蛛池模板: 国产无区一区二区三麻豆 | 天干天干天干夜夜爽av | 久久精品中文字幕第一页 | 中国女人啪啪69xxⅹ偷拍 | 久久中文精品视频 | 国产不卡一二三 | 久久永久免费人妻精品下载 | 无码中文国产不卡视频 | 国产精品无码不卡一区二区三区 | 国产精品伦一区 | www.久久精品 | 亚洲成人福利 | 亚洲天堂网一区 | 久久大香伊蕉在人线观看热 | 亚洲精品久久五月天堂 | 国产亚洲日韩欧美另类第八页 | 香蕉在线网 | 性饥渴艳妇性色生活片在线播放 | 色婷婷影院 | 九九九久久久 | 看全色黄大色大片免费久久 | 亚洲最大的av网站 | 日本一道一区二区视频 | 日日夜夜操操操 | 国产精品香蕉 | 国产成人8x人网站在线视频 | 国产成人久久777777 | 欧美视频1区 | 国产福利视频一区二区精品 | 男人的天堂在线观看av | 欧美精品在线免费 | 一本色道久久爱88av | 亚洲国产精品成人va在线观看 | 亚洲国产成人精品av区按摩 | 又黄又爽又无遮挡免费的网站 | 国产精品美脚玉足脚交 | 亚洲 欧美 影音先锋 | 欧美成人va免费看视频 | 四虎国产精品永久在线下载 | 91久久久久久久久久 | 性裸交a片一区二区三区 | 女m羞辱调教视频网站 | 四虎影视精品永久在线观看 | 国产亚洲中文日本不卡二区 | 国产精品白丝av嫩草影院 | 少妇无码av无码一区 | 超碰精品在线观看 | 拔萝卜视频在线观看高清版 | 免费av网站在线播放 | 成人片黄网站色大片免费观看 | 天天射天天干天天爽 | 91夜夜未满十八勿入爽爽影院 | 免费无码黄动漫在线观看 | 天堂激情网 | 欧美a视频在线观看 | 日本成人在线免费 | 欧美激情小说视频 | 欧美丰满少妇xxxx性 | 亚洲天堂资源 | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 欧美成人精品一区二区综合 | 国产第|页日本草草影院一 天天天天噜在线视频 | 国产精品久久久久一区二区 | 天堂网中文| 四虎影视在线播免费观看 | 久久r视频 | 日本少妇高潮喷水免费可以看 | 国产一级一片免费播放 | 中出あ人妻熟女中文字幕 | 97人人艹 | 夜夜操女人 | 国产精品夜色一区二区三区 | 狠狠色噜噜狠狠狠888777米奇 | 亚洲乱亚洲乱妇中文影视 | 99re8在线精品视频免费播放 | 在线观看人成视频免费 | 在线天天干 | 国产精品无码av一区二区三区 | 亚洲图片校园另激情类小说 | 国产午夜精品免费一区二区三区 | 精品视频在线观自拍自拍 | 亚洲欧美成人中文日韩电影网站 | 欧美性free玩弄少妇 | 日本丰满熟妇videossex8k 亚洲成av人片在 | 婷婷深爱五月 | 亚洲精品国产精品国自产观看 | 91爱国产 | 欧美性猛交久久久乱大交小说 | 玩肥熟老妇bbw视频 亚洲精品码 | 天天做夜夜爽 | 成人三级视频在线观看不卡 | 精品国产髙清在线看国产毛片 | 青久在线| 国产在线精品观看免费观看 | 天海翼一区二区三区免费 | 婷婷色香五月综合激激情 | 国产精品国产三级国av在线观看 | 国产专区视频 | 国产激情久久久久影院小草 | 精品国产一区二区三区日日嗨 | 免费人成再在线观看网站 | 日韩精品极品免费视频 | 色91精品久久久久久久久 | 天天爽夜夜爽精品视频婷婷 | 少妇激情偷公乱柔佳 | 欧洲熟妇色xxxx欧美老妇多毛 | 日韩高清在线观看不卡一区二区 | 久久99九九 | 免费av网站在线 | 日韩黄色在线观看 | 美女人人操 | 91av在线视频观看 | 亚洲乱码日产精品bd | 成人涩涩日本国产一区 | 欧美日韩在线网站 | jul094在线播放一色桃子 | 在线看片免费不卡人成视频 | 在线免费观看视频你懂的 | 少妇被粗大的猛进出69影院 | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 国产精品伦一区二区三区 | 无码av喷白浆在线播放 | 国语av | 国产黄色一区二区三区 | 久久精品无码中文字幕老司机 | 五月天久久婷婷 | 成人精品动漫一区二区三区 | 青草福利在线 | 婷婷色在线视频 | 亚洲成av人在线观看天堂无码 | 精品久久久久国产免费 | 国产级毛片 | 女女百合av大片一区二区三区九县 | 亚洲国产成人在人网站天堂 | 欧美激情一区在线 | 91精品国产99久久久 | 狠狠干激情| 女女综合网 | 久久久久高潮毛片免费全部播放 | 国产黄色aaa| 人人妻人人澡人人爽精品欧美 | 亚洲a片成人无码久久精品色欲 | 亚洲阿v天堂在线2017免费 | ass亚洲尤物裸体pics | 欧美激情视频网 | 国产爆乳无码视频在线观看3 | 国产视频色 | 色偷偷噜噜噜亚洲男人的天堂 | 久久久亚洲欧美 | 色综合久久久久综合一本到桃花网 | 99精品国产aⅴ | 欧美在线性爱视频 | 狠狠久久噜噜熟女 | 亚洲人成亚洲人成在线观看 | 免费国产在线精品一区 | 精品国产乱码久久久久久免费 | 亚洲精品国产精华液 | 人人干97 | 做性久久久久久 | 成人爱视频| 亚洲变态另类天堂av手机版 | 欧美大荫蒂毛茸茸视频 | 亚洲区小说| 日本乱淫视频 | 成 人 色 网 站免费观看 | 中文字幕日韩亚洲 | 四虎影院在线观看免费 | 国产爽视频在线观看视频 | 国产一区精品在线 | 日韩中字在线观看 | 国产午夜精品一二区理论影院 | 国产一区二区三区 韩国女主播 | 日韩精品免费一区二区夜夜嗨 | 午夜福利精品视频免费看 | 亚洲高清中文字幕在线看不卡 | 久久久精品久久久久久96 | 国产乱码免费卡1卡二卡3 | av区无码字幕中文色 | 欧美激情精品久久 | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 男人和女人上床的视频 | 91日本在线观看 | 色综合色综合久久综合频道88 | 亚洲h视频在线 | 日本精品少妇人妖啪啪 | 国产亚洲精品久久久久婷婷图片 | 日日日日日日bbbbbb | 欧美日韩久久久久 | 欧美亚洲国产片在线播放 | 韩国三级中文 | 国产1区 2区 3区 | 亚洲精品无码av黄瓜影视 | 蜜芽av无码精品国产午夜 | 亚洲乱亚洲乱妇无码麻豆 | 国产成人麻豆精品午夜在线 | 又爽又黄又无遮挡网站 | 亚洲国产一成人久久精品 | 色噜噜狠狠成人中文 | 国产传媒久久久 | 国产精品777 | 2020久久超碰国产精品最新 | 在线免费观看毛片视频 | 97在线观看永久免费视频 | 欧美 日韩 国产 一区二区三区 | 96国产精品 | 蜜臀av色欲a片无人一区 | 色男人的天堂 | wwwxxx.日本 | 精品网站999www| 日韩看片网站 | 欧美午夜久久 | 又黄又无遮挡aaaaa毛片 | 粉嫩极品美女国产在线观看 | 波多野结衣亚洲天堂 | 日本精品久久久久久久 | 欧美精品四区 | 天天操天天撸 | 国产精品一区二区高清在线 | 色伊人网| 野花中文免费观看6 | 综合 欧美 亚洲日本 | 天天射天天爱天天干 | 国产一级特黄aaa大片评分 | av一区二 | 青草久久久国产线免观 | 视频在线观看一区二区 | 亚洲va欧美va国产综合先锋 | 成年人视频网址 | 欧美大片一区 | 国产97碰免费视频 | 色婷婷五月综合丁香中文字幕 | 国产做受高潮69 | 91在线视频观看 | 亚洲高清专区日韩精品 | 懂色av噜噜一区二区三区av88 | 九九99久久 | 在线观看亚洲精品视频 | 波多野结衣av在线无码中文观看 | 国产色情又大又粗又黄的电影 | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 中文字幕一区二区三区第十负 | 国产又白又嫩又爽又黄 | 色视频综合无码一区二区三区 | 欧美老熟妇videos极品另类 | 欧美熟妇精品一区二区三区 | 日韩美女爱爱 | www.超碰在线 | 91在| 欧美成人精品 | 无码福利在线观看1000集 | 亚洲乱码高清午夜理论电影 | 免费国产又色又爽又黄的软件 | 中文字幕一区三级久久日本 | 日日夜夜中文字幕 | 国产ae86亚洲福利入口 | 国产精品国产三级国产a | 中国老妇荡对白正在播放 | 制服 丝袜 人妻 专区一本 | 久久无码人妻精品一区二区三区 | 夜鲁很鲁在线视频 | 伊人网综合视频 | 亚洲色大成网站www 国产1区二区 | 天堂在线中文 | 亚洲精品久久片久久久久 | 老熟女高潮一区二区三区 | 一道日本中文版高清视频 | 色婷婷婷婷 | 男女无套免费视频网站 | 亚洲成色在线综合网站 | 天天影视色香欲综合久久 | 好色视频网 | 亚洲国产精品成人影片久久 | 欧洲亚洲精品久久久久 | av无码av在线a∨天堂app | 久草视频在线观 | 欧美国产综合 | 日韩动态视频 | 久久婷婷成人综合色综合 | 国产精品综合av一区二区国产馆 | 国产精品久久久久9999不卡 | 国产v视频在线亚洲视频 | 国产精品久久国产精品99 gif | 窝窝影院午夜看片 | 中文字幕亚洲精品在线 | 男女下面进入的视频免费午夜 | 印度最猛性xxxxx69交 | 黑人玩弄人妻中文在线 | 成人黄网站高清免费视频 | 精品国产一区二区三区四区vr | 亚洲欧美日韩高清一区 | 亚洲三区视频 | 丁香花中文在线免费观看 | 中文字幕亚洲情99在线 | 一本久久伊人热热精品中文字幕 | 无码人妻一区二区三区免费手机 | 最新亚洲春色av无码专区 | 成人av18 | 在线观看你懂的网站 | 啦啦啦www播放日本观看 |